شرایط HPLC برای آنالیز 72 - 57 - 1 چیست؟
به عنوان یک تامین کننده ترکیب با شماره CAS 72 - 57 - 1، اغلب در مورد شرایط کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) برای تجزیه و تحلیل این ماده سوالاتی دریافت می کنم. در این پست وبلاگ، برخی از بینش ها را در مورد شرایط HPLC به اشتراک خواهم گذاشت که می تواند برای تجزیه و تحلیل 72 - 57 - 1 استفاده شود.
درک 72 - 57 - 1
قبل از بررسی شرایط HPLC، درک ماهیت ترکیب 72 - 57 - 1 ضروری است. در حالی که خود شماره CAS بلافاصله ساختار شیمیایی را آشکار نمی کند، می دانیم که یک موجود شیمیایی خاص با خواص فیزیکی و شیمیایی منحصر به فرد است. این ویژگیها نقش مهمی در تعیین شرایط HPLC مناسب برای آنالیز آن دارند.
انتخاب ستون HPLC
انتخاب ستون HPLC یک مرحله اساسی در تجزیه و تحلیل است. برای تجزیه و تحلیل 72 - 57 - 1، ستون فاز معکوس اغلب نقطه شروع خوبی است. ستون های فاز معکوس، مانند ستون های C18، به طور گسترده ای مورد استفاده قرار می گیرند، زیرا می توانند طیف گسترده ای از ترکیبات را بر اساس آب گریزی خود جدا کنند. فاز ثابت یک ستون C18 شامل گروه های اکتادسیل سیلان با زنجیره بلند است که به یک تکیه گاه سیلیسی متصل شده اند. ترکیبات با آب گریزی متفاوت با این فاز ثابت برهمکنش متفاوتی خواهند داشت که منجر به جدایی می شود.
گزینه دیگر می تواند یک ستون C8 باشد. ستون های C8 دارای زنجیره آلکیل کوتاه تری در مقایسه با ستون های C18 هستند که می تواند منجر به ویژگی های جداسازی متفاوتی شود. اگر 72 - 57 - 1 آبگریزی نسبتاً پایینی داشته باشد، یک ستون C8 ممکن است جداسازی بهتری را فراهم کند.
ترکیب فاز موبایل
فاز متحرک یکی دیگر از عوامل مهم در تجزیه و تحلیل HPLC است. برای تجزیه و تحلیل 72 - 57 - 1، معمولاً از یک سیستم فاز متحرک باینری استفاده می شود. یک سیستم دوتایی معمولی از یک حلال قطبی مانند آب و یک حلال آلی مانند استونیتریل یا متانول تشکیل شده است.
نسبت حلال های قطبی و آلی می تواند به طور قابل توجهی بر جداسازی تأثیر بگذارد. اگر 72 - 57 - 1 یک ترکیب نسبتاً قطبی باشد، ممکن است نسبت بیشتری از آب در فاز متحرک مورد نیاز باشد. از سوی دیگر، اگر ترکیب آبگریز تری باشد، درصد بیشتری از حلال آلی برای خروج آن از ستون مورد نیاز خواهد بود.
به عنوان مثال، یک ترکیب فاز متحرک شروع می تواند 70٪ آب و 30٪ استونیتریل باشد. این نسبت را می توان بر اساس نتایج جداسازی اولیه تنظیم کرد. روش شستشوی گرادیان نیز می تواند مورد استفاده قرار گیرد. در شستشوی گرادیان، ترکیب فاز متحرک در طول زمان تغییر می کند. این می تواند مفید باشد اگر 72 - 57 - 1 در یک ماتریس نمونه پیچیده وجود داشته باشد، زیرا امکان جداسازی بهتر اجزای مختلف را فراهم می کند.
نرخ جریان
نرخ جریان فاز متحرک از طریق ستون نیز بر تجزیه و تحلیل تأثیر می گذارد. نرخ جریان معمولی برای آنالیز HPLC از 0.5 تا 2 میلی لیتر در دقیقه متغیر است. نرخ جریان کمتر می تواند جداسازی بهتری را فراهم کند اما ممکن است زمان تجزیه و تحلیل را افزایش دهد. از سوی دیگر، نرخ جریان بالاتر، می تواند زمان تجزیه و تحلیل را کاهش دهد، اما ممکن است مقداری راندمان جداسازی را قربانی کند.
برای تجزیه و تحلیل 72 - 57 - 1، سرعت جریان 1 میلی لیتر در دقیقه اغلب نقطه شروع خوبی است. این نرخ جریان را می توان بر اساس ابعاد ستون، ماهیت ترکیب و زمان جداسازی مورد نظر بهینه کرد.
تشخیص
روشهای تشخیص متعددی در HPLC وجود دارد و انتخاب به خواص 72 - 57 - 1 بستگی دارد. تشخیص UV - Vis یکی از متداولترین روشها است. اگر 72 - 57 - 1 دارای کروموفور است که نور را در ناحیه UV یا مرئی جذب می کند، می توان از تشخیص UV - Vis برای تعیین کمیت ترکیب استفاده کرد.
طول موج برای تشخیص UV - Vis باید بر اساس طیف جذب 72 - 57 - 1 انتخاب شود. آشکارساز آرایه دیودی (DAD) میتواند به ویژه مفید باشد زیرا امکان تشخیص همزمان طولموجهای چندگانه را فراهم میکند که میتواند اطلاعات بیشتری در مورد ترکیب ارائه دهد و به شناسایی آن کمک کند.
سایر روشهای تشخیص، مانند تشخیص فلورسانس یا تشخیص طیفسنجی جرمی (MS) نیز میتوانند در نظر گرفته شوند. تشخیص فلورسانس بسیار حساس است و اگر 72 - 57 - 1 فلورسنت باشد می توان از آن استفاده کرد. تشخیص MS اطلاعاتی در مورد وزن مولکولی ترکیب ارائه می دهد که می تواند برای شناسایی آن ارزشمند باشد.


آماده سازی نمونه
آماده سازی نمونه مناسب برای آنالیز دقیق HPLC ضروری است. نمونه باید در یک حلال مناسب که با فاز متحرک سازگار باشد حل شود. اگر نمونه حاوی ناخالصی یا ذرات معلق باشد، باید از طریق فیلتر 0.2 - 0.45 میکرومتر فیلتر شود تا از گرفتگی ستون جلوگیری شود.
غلظت نمونه نیز باید به دقت کنترل شود. اگر نمونه بیش از حد متمرکز باشد، می تواند ستون را اضافه بار کند و منجر به جداسازی ضعیف شود. اگر خیلی رقیق باشد، ممکن است سیگنال برای تشخیص دقیق خیلی ضعیف باشد.
مقایسه با ترکیبات مرتبط
برای درک بیشتر شرایط HPLC برای 72 - 57 - 1، مقایسه آن با ترکیبات مرتبط می تواند مفید باشد. به عنوان مثال،Direct Blue 53 CAS: 314 - 13 - 6،Direct Blue 25 CAS: 2150 - 54 - 1، وDirect Red 31 CAS: 5001 - 72 - 9همگی رنگ هایی با ساختار شیمیایی خاص هستند. با مطالعه شرایط HPLC مورد استفاده برای این ترکیبات مرتبط، می توانیم بینشی در مورد چگونگی بهینه سازی شرایط برای 72 - 57 - 1 به دست آوریم.
اعتبار سنجی روش HPLC
پس از انتخاب شرایط HPLC، روش باید اعتبار سنجی شود. اعتبارسنجی شامل نشان دادن دقیق، دقیق، خاص، خطی و قوی بودن روش است. دقت به میزان نزدیک بودن مقادیر اندازه گیری شده به مقادیر واقعی اشاره دارد. دقت، درجه تکرارپذیری روش است. ویژگی تضمین می کند که روش می تواند به طور انتخابی 72 - 57 - 1 را در حضور سایر اجزاء تشخیص دهد. خطی بودن به این معنی است که یک رابطه خطی بین غلظت ترکیب و پاسخ آشکارساز وجود دارد. استحکام نشان میدهد که روش میتواند تغییرات کوچکی را در شرایط آزمایشی بدون تغییرات قابلتوجه در نتایج تحمل کند.
نتیجه گیری
در نتیجه، تعیین شرایط HPLC برای تجزیه و تحلیل 72 - 57 - 1 نیاز به درک جامع از خواص ترکیب، انتخاب دقیق ستون، فاز متحرک، سرعت جریان، و روش تشخیص، و همچنین آماده سازی نمونه مناسب و اعتبار سنجی روش دارد. با دنبال کردن این مراحل و مقایسه با ترکیبات مرتبط، میتوانیم یک روش HPLC موثر برای آنالیز 72 - 57 - 1 ایجاد کنیم.
اگر مایل به خرید 72 - 57 - 1 هستید یا در مورد تجزیه و تحلیل آن سؤالی دارید، لطفاً برای بحث بیشتر و مذاکرات احتمالی خرید با ما تماس بگیرید.
مراجع
- اسنایدر، الآر، کرکلند، جیجی، و گلاج، جیال (1997). توسعه روش عملی HPLC جان وایلی و پسران
- مک مستر، ام سی (2006). اصول HPLC شرکت واترز
